| 產(chǎn)品名稱 |
人皮膚癌組織源性原代細(xì)胞 |
| 商品貨號(hào) |
MZ-4281 |
| 組織來(lái)源 |
中國(guó)成年病人手術(shù)后的皮膚癌組織。 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。 |
| 細(xì)胞描述 |
皮膚癌包括基底細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、惡性黑色素瘤、惡性淋巴瘤、特發(fā)性出血性肉瘤（Kaposi 肉瘤）、汗腺癌、隆突性皮膚纖維肉瘤、血管肉瘤等，其中以基底細(xì)胞癌和鱗狀細(xì)胞癌最為 常見，約占皮膚癌的90％。 在皮膚癌中以基底細(xì)胞癌最多見，占60％以上。 |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 組織學(xué)分類 |
在組織病理學(xué)上基底細(xì)胞癌可分為分化型與未分化型兩大類： 1、未分化型可表現(xiàn)為實(shí)性型、色素型、纖維化型或硬斑狀、淺表型。 （1）實(shí)性型可見多少不一、形態(tài)不同的癌腫團(tuán)塊埋在真皮內(nèi)； （2）色素型瘤細(xì)胞間有較多黑色素； （3）纖維化型或硬斑狀型具有顯著的結(jié)締組織增生，結(jié)締組織成條束地包繞瘤細(xì)胞群；淺 表型在表皮下有較多短小的花蕾狀瘤細(xì)胞團(tuán)。 2、分化型可出現(xiàn)向毛發(fā)結(jié)構(gòu)分化的角化型基底細(xì)胞癌，向皮脂腺分化的囊腫型基底細(xì)胞癌， 向大汗腺分化的腺樣基底細(xì)胞癌等。 |
| 病理分期 |
皮膚癌常見有鱗狀細(xì)胞癌和基底細(xì)胞癌： 1、鱗狀細(xì)胞癌：惡性程度較高，多發(fā)于頭頸、四肢、軀干等部位的皮膚、粘膜及皮膚粘膜 交界處，早期即可形成潰瘍，生長(zhǎng)呈浸潤(rùn)性，浸入深部組織時(shí)，常伴有化膿性感染和淋巴結(jié) 轉(zhuǎn)移。易在色素性干皮病、老年性角化病基礎(chǔ)上演變而來(lái)。 根據(jù)腫瘤中不典型鱗狀細(xì)胞所占比例，可將鱗狀細(xì)胞癌分成四度： I 度鱗癌：瘤組織不超過汗腺水平，不典型鱗狀細(xì)胞少于25％，有很多角珠，真皮內(nèi)有明顯 的炎性反應(yīng)； II 度鱗癌：癌細(xì)胞團(tuán)界限不清，不典型鱗狀細(xì)胞約占25％～50％，只有少數(shù)角珠，角珠中 心多角化不全，周圍炎癥反應(yīng)較輕； III 度鱗癌：不典型鱗狀細(xì)胞約占50％～75%，大部分沒有角化，無(wú)角珠，周圍炎癥反應(yīng)不 顯著； IV 度鱗癌：不典型鱗狀細(xì)胞占75％以上，核分裂象多，無(wú)細(xì)胞間橋，無(wú)角。2、基底細(xì)胞癌：多見于40 歲以上的患者，好發(fā)于額面、眼眶、眼瞼、鼻側(cè)、耳周圍等處， 惡性程度較底，生長(zhǎng)甚為緩慢，病程超過10～20 年者極為常見，初起時(shí)多為一增厚的小塊， 逐漸呈隆起向周圍浸潤(rùn)，很少轉(zhuǎn)移。鱗狀細(xì)胞癌多見于50 歲以上的患者。皮膚癌在我國(guó)約 占全部惡性腫瘤的1．5%，南方發(fā)病率比北方高。一般認(rèn)為手掌及腳底不發(fā)生基底細(xì)胞癌 和鱗狀細(xì)胞癌。真皮內(nèi)有邊界明顯的瘤細(xì)胞群，胞核較正常稍大，呈卵形或長(zhǎng)形，胞漿少， 細(xì)胞間界限不清，細(xì)胞間無(wú)間橋，因此，像很多細(xì)胞核密布在一個(gè)共同漿液中，細(xì)胞核染色 無(wú)顯著差異。有時(shí)可見細(xì)胞多核或核深染或呈不規(guī)則星狀核。瘤細(xì)胞群周圍結(jié)締組織增生， 在最外層排列成柵狀的栓狀細(xì)胞，瘤組織周圍?？梢姷皆S多幼稚纖維母細(xì)胞及成熟的纖維細(xì) 胞混雜一起?；准?xì)胞癌間質(zhì)含有粘蛋白，在制作切片時(shí)間質(zhì)收縮，使間質(zhì)與腫瘤團(tuán)塊邊緣 呈裂隙狀分離，對(duì)本病診斷有一定意義。 |
