在一個健康人腸道中棲息著大量的細菌。小腸上端細菌較少，下端急劇增多。大腸則是各種細菌 理想的存在環(huán)境，大腸下端約有 100 多種細菌菌群，其細菌濃度可達 10 11個/ g 大便，即大便重量的 1/3 是細菌，這些細菌對人體來說，有些是有益菌，有些是有害菌，它們按一定的菌群比例定植于腸壁上。在正常情況下，由于有益菌(主要是雙歧桿菌)在數(shù)量上占明顯優(yōu)勢，使細菌種群之間、細菌與人之間，保持著一種共生的生態(tài)學關(guān)系和動態(tài)平衡。

 

如果菌群比例失調(diào)、雙歧桿菌數(shù)量減少就會導致人體的病變，同樣當人體健康狀況變化，如創(chuàng)傷、大量使用抗生素、機體衰老等均會導致腸道菌群種類和數(shù)量的 變化，反過來又對機體健康不利而形成惡性循環(huán)。

 

雙歧桿菌屬中有 24 個種，其中常見和常用的種有：嬰兒雙歧桿菌、兩歧雙歧桿菌、長雙歧桿菌、青春雙歧桿菌和短雙歧桿菌。雙歧桿菌的代謝產(chǎn)物對致病菌具有很強的拮抗作用。它們的抑菌機理主要是 產(chǎn)生有機酸使腸道 pH 值降低，抑制了致病菌的生長繁殖；有些雙歧桿菌的種還可以產(chǎn)生抗菌類物質(zhì)。

 

青春雙歧桿菌 （Bifidobacterium adolescentic）是青年個體腸道中的優(yōu)勢菌，對人體產(chǎn)生許多益生作用。但由于青春雙歧桿菌對氧非常敏感，對低 pH 的抵抗能力差，并對營養(yǎng)要求苛刻，在獲取高活菌數(shù)培養(yǎng)物時有一定困難。研究指出凝膠微球包囊法能夠改善青春雙歧桿菌暴露在胃腸道時的存活率；許多研究報道添加蛋白胨、半胱氨酸、酵母浸出物、寡聚糖等營養(yǎng)物質(zhì)可以提高雙歧桿菌的活菌數(shù)，但成本過高、操作繁瑣，不適合大規(guī)模生產(chǎn)使用。

 

二、應用

 

1、有研究益生菌制劑來源的青春雙歧桿菌對大腸埃希菌的體外抑菌作用。

 

將青春雙歧桿菌與大腸埃希菌分別單獨培養(yǎng)，測定不同培養(yǎng)時間的 pH 值和活菌數(shù)，然后將兩菌進行混合培養(yǎng)，再測 pH 值和活菌數(shù)，并與單獨培養(yǎng)時的結(jié)果 進行比較。結(jié)果顯示瓊脂平板打孔法顯示青春雙歧桿菌上清液有抑菌功能；共培養(yǎng)法顯示青春雙歧桿菌可抑制大腸埃希菌增殖的數(shù)量，而自身數(shù)量不受影響。因此青春雙歧桿菌的酸性代謝產(chǎn)物是主要的抑菌物質(zhì)。

 

還有研究用耐氧青春雙歧桿菌，利用其培養(yǎng)物上清、蛋白提取液和多糖提取液做抗菌試驗 結(jié)果表明：其培養(yǎng)物上清和多糖提取液的抗菌作用相似，只對革蘭陽性菌作用較強，說明耐氧青春雙歧桿 菌的抗菌作用與其產(chǎn)生的胞外多糖有關(guān)；但由于胞外多糖的提取不完全，因此多糖水溶液的抗菌作用弱于 細菌培養(yǎng)物上清。

 

至于其抗菌作用機制，可能與革蘭 陽性菌細胞壁結(jié)構(gòu)有關(guān)。而青春雙歧桿菌的蛋白提 取液無抗細菌和真菌作用，多糖提取液具有較弱的抗 革蘭陰性菌的作用，其抗菌機制可能是因為多糖提取液中含有酸性物質(zhì)，其 pH 偏低有關(guān)。

 

2、制備青春雙歧桿菌凝固型酸奶。

 

有研究以鮮牛奶、白砂糖為主要原料，以青春雙歧桿菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌為發(fā)酵劑，制成營養(yǎng)保健的青春雙歧桿菌凝固型酸奶。通過試驗確定了青春雙歧桿菌凝固型酸奶最佳工藝為：白砂糖8%，接種量3%，保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌青春雙歧桿菌，發(fā)酵4 h。

 

結(jié)合MRS培養(yǎng)基和LM-MRS培養(yǎng)基可以對青春雙歧 桿菌凝固型酸奶中三種乳酸菌分別計數(shù)。青春雙歧桿菌凝固型酸奶中保加利亞乳桿菌活菌數(shù)為8.0×108 cfu·mL-1，嗜熱鏈球菌活菌數(shù)為8.5×108 cfu·mL-1，青春雙歧桿菌活菌數(shù)為2.0×106 cfu·mL-1。工藝流程如下：

 

 

3、青春雙歧桿菌對潰瘍性結(jié)腸炎( UC) 患者血清相關(guān)因子有一定影響。

 

有實驗采用酶聯(lián)免疫吸附試驗( ELISA) 法檢測 UC 患者治療前后及正常對照組血清腫瘤壞死因子( TNF) -α，干擾素( IFN) -γ，白細胞介素( IL) -6 及 IL-10 的水平，并分別比較各組細胞因子水平的差異。

 

結(jié)果顯示 UC 患者血清 TNF-α、IFN-γ、IL-6 水平明顯高于正常對照組，而 IL-10 水平明顯低于正常對照組；傳統(tǒng)治療組及雙歧桿菌治療組血清 TNF-α、IFN-γ、IL-6 水平較治療前下降，而 IL-10 水平較治療前升高，兩治療組與正常對照組相比無明顯差異因此青春雙歧 桿菌可以降低 UC 患者血清促炎因子 TNF-α、IFN-γ 及 IL-6 水平，還可升高抑炎因子 IL-10 水平，調(diào)節(jié)腸黏膜的細胞免疫功能，可用于 UC 的治療。

 

4、代謝低聚木糖。

 

有研究對青春雙歧桿菌代謝低聚木糖的動力學行為進行了探討，同時對青春雙歧桿菌代謝低聚木糖時各組分的變化規(guī)律及代謝產(chǎn)物進行了研究。結(jié)果表明，青春雙歧桿菌代謝低聚木糖 48 h后，總糖質(zhì)量濃度從最初的 5.00 g/L降至 3.59 g/L，菌體質(zhì)量濃度從 0.10 g/L上升至 0.35 g/L，培養(yǎng)體系的 pH 值從 7.00降至 4.75。

 

青春雙歧桿菌代謝低聚木糖時，首先代謝木二糖至木五糖組分，此后，其分泌的 α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶將低聚木糖組分中的阿拉伯糖基側(cè)鏈水解釋放，并作為青春雙歧桿菌的碳源。代謝過程中，青春雙歧桿菌還能分泌 β-D-木糖苷酶作用于低聚木糖的末端，釋放出木糖，最終導致木糖在培養(yǎng)體系中累積。代謝產(chǎn)物分析結(jié)果顯示，青春雙歧桿菌代謝低聚木糖的代謝產(chǎn)物主要有乳酸、乙酸、丙酸和丁酸。

 

三、培養(yǎng)條件

 

通過單因素試驗確定青春雙歧桿菌工業(yè)化培養(yǎng) 基成分為：脫脂乳 8%（W/V）、雙歧因子 A 1%（W/ V）、雙歧因子 B 1%（W/V）。利用上述培養(yǎng)基，確 定了青春雙歧桿菌的最佳接種量為 1%（V/V）、最佳 培養(yǎng)溫度為 37 。在此條件下，測定了青春雙歧 桿菌的生長曲線和 pH 值變化，在 37 厭氧條件下 培養(yǎng)時間 9 h 為最佳生長條件，此時青春雙歧桿菌 活菌數(shù)最高可達 1.16×109 cfu·mL-1。雙歧因子 A 的 存在對青春雙歧桿菌的生長有明顯促進作用。