一、背景
大腸艾希氏菌H7診斷血清是用于大腸艾希氏菌H7鑒定實驗的血清學(xué)診斷血清。細(xì)菌血清學(xué)反應(yīng)是指相應(yīng)的抗原與抗體在體外一定條件下作用，可出現(xiàn)肉眼可見的沉淀、凝集現(xiàn)象
在食品微生物檢驗中，常用血清學(xué)反應(yīng)來鑒定分離到的細(xì)菌，以最終確認(rèn)檢測結(jié)果。第一階段為抗原抗體特異性結(jié)合階段，反應(yīng)速度很快，只需幾秒至幾分鐘反應(yīng)即可完畢，但不出現(xiàn)肉眼可見現(xiàn)象。第二階段為抗原抗體反應(yīng)的可見階段，表現(xiàn)為凝集、沉淀、補體結(jié)合反應(yīng)等。腸桿菌科是由多個菌屬組成，生物學(xué)性狀相似，均為革蘭氏陰性桿菌，這些細(xì)菌常寄居在人和動物的消化道，并隨糞便排出體外，廣泛分布在水和土壤中，大多數(shù)腸道桿菌屬于正常菌群。當(dāng)機體免疫力降低或侵入腸道外組織時，成為條件致病菌而引起疾病。部分腸道桿菌是致病菌。例如：產(chǎn)毒大腸埃希氏菌、傷寒沙門氏菌、各種志賀氏菌可使人患腸道傳染病。
EHEC除其代表菌株O157:H7外，還包括O157:NM、O26:H11、O111:H8、O125:NM、O121:H19、O45:H2、O4:NM、O145:NM、O5:NM、O91:H21、O103:H2、O113:H2等血清型的部分菌株。血清學(xué)鑒定包括O抗原和H抗原的鑒定。前者可使用玻片凝集試驗或膠乳凝集試驗；后者則應(yīng)先進(jìn)行動力試驗，動力活潑者再進(jìn)行玻片和試管凝集試驗。EHECO157:H7的另一個顯著特征是可產(chǎn)生大量的Vero毒素（VT），也稱作類志賀氏毒素（SLT），是EHEC的主要致病因子。Vero毒素按免疫原性等方面的不同可分為VT1和VT2。該毒素有一個A亞單位和5~6個B亞單位組成。B亞單位與宿主腸壁細(xì)胞糖脂受體結(jié)合，具有毒素活性的A亞單位進(jìn)入細(xì)胞，改變60s核糖體的組分，干擾蛋白質(zhì)的合成。編碼VT的基因位于噬菌體上，可缺失而不產(chǎn)生VT。
二、應(yīng)用
大腸艾希氏菌H7診斷血清用于牛源性致病性大腸桿菌的分離鑒定及E.coli O157:H7生物學(xué)特性研究。
大腸埃希氏菌(Escherichia coli)，俗稱大腸桿菌，埃希氏菌屬，屬于腸桿菌科（Enterobacterriaceae)。絕大多數(shù)是溫血動物腸道中占優(yōu)勢的兼性厭氧寄居菌群，在正常情況下對動物機體不具有致病能力。但后來研究發(fā)現(xiàn)，不同的血清型對機體的致病能力有所不同，O157:H7血清型是大腸桿菌的主要血清型，是與人類的出血性結(jié)腸炎和溶血性尿毒綜合征相關(guān)，E.coli O157:H7是牛、羊等反芻動物無癥狀攜帶的，由于O157:H7的感染劑量低、致病性強和嚴(yán)重的臨床癥狀，使其感染已成為一個全球性廣泛關(guān)注的公共衛(wèi)生問題。
E.coliO157:H7的半數(shù)致死量（LD50）為7.9×10~7CFU，z小致死量（MLD）為5.0×10~6CFU；采用PCR法對E.coli O157:H7分離菌株進(jìn)行毒力基因的檢測，檢測到有eaeA、stx1和hly基因的存在。安徽牛場（A1菌株）和山東牛場（S1菌株）分離出的病原菌經(jīng)PCR鑒定均為大腸埃希氏菌，A1菌株的生化結(jié)果顯示：對葡萄糖、乳糖、木糖、甘露糖、麥芽糖、蕈糖、果糖、硝酸鹽、山梨醇、衛(wèi)矛醇和靛基質(zhì)為陽性；棉子糖、VP、蔗糖、H2S和枸櫞酸鹽為陰性。
藥敏試驗結(jié)果顯示：對頭孢他啶、丁胺卡那霉素、妥布霉素、頭孢哌酮以及呋喃妥因有較高的敏感性；但是對紅霉素、頭孢噻腭以及氧氟沙星、利福平有輕微的耐藥性；對環(huán)丙沙星、氯霉素以及四環(huán)素等抗生素有較強的耐藥性。
致病性實驗結(jié)果表明有一定的致病性；S1菌株的生化結(jié)果顯示：對葡萄糖、乳糖、木糖、甘露糖、麥芽糖、蕈糖、果糖、硝酸鹽、山梨醇、蔗糖、衛(wèi)矛醇和靛基質(zhì)為陽性；棉子糖、VP、H2S和枸櫞酸鹽為陰性；藥敏試驗結(jié)果顯示：對氯霉素、鏈霉素、諾氟沙星以及紅霉素等抗生素有很強的耐藥性；對頭孢哌酮、丁胺卡那霉素有較強的敏感性；對頭孢他啶、妥布霉素的耐藥程度較低；對呋喃妥因沒有表現(xiàn)出明顯的敏感性，處于中介；致病性實驗結(jié)果表明有一定的致病性。
